本剧紧紧围绕着一个安守本分中年司机杨树与女王气质少女怀春的都市铿锵玫瑰般的女老板唐红和大龄女青年绿茶女神的羞涩水莲花似的白骨精顾菁菁开展，叙述了一段丰富多彩都市三角主仆恋。人到中年的杨树是单身女老板唐红的私人司机，带着18岁的女儿杨树苗，青春期的她骄纵强硬，和杨树矛盾不断。唐红始终没有结婚，尽管身旁有土老板孟来财追求，但她深爱着杨树，对杨树苗也关爱有加。碍于身份的考量，正直老实的杨树始终不愿意接受唐红的爱意。在女儿设计下，杨树认识了颇像前妻的年轻女孩顾菁菁，两人共生好感。杨树就这样夹在了唐红和顾菁菁之间，一幕幕喜剧故事上演。之后，前妻的回国，让杨树放下了对前妻的执着，在与唐红的相处中杨树看清自己的感情，勇敢面对她的爱，两人最后走到一起；顾菁菁在与孟来财相识后，相知相惜的二人也产生真挚感情，最后四人各自情归所属。
《一仆二主》由于主推“差异恋”而成为观众热议的话题。除去张嘉译和闫妮戏中夺人眼球的“主仆恋”以外，江疏影饰演的女二号顾菁菁是当今独立剩女的代表，这个既拜金又期待拥有真正爱情的“物质女孩”形象引发了许多观众的反感。有人觉得装纯洁还比不上真实地拜金，也有人表示这个角色很真实，点中了大家的穴。
