《猫和老鼠》以闹剧为特点，勾勒了一对儿水火不相容的冤家：汤姆和杰瑞猫鼠彼此之间的战斗，剧中的汤姆常常应用奸诈的诡计来应对杰瑞，而杰瑞则常常运用汤姆诡计中的漏洞逃离他的迫害并给以还击。《猫和老鼠》的故事情节紧紧围绕着一对儿常见的家猫汤姆和老鼠杰瑞而进行，汤姆有种很强的冲动，一直持续尽力的去捉同居一室的老鼠杰利，并不断尽力驱逐着这名反感的房客。虽然一直失败，但汤姆在追逐中遭受的快乐远远地超出了抓住杰瑞。另外，汤姆在剧中常常应用斧头、锤头、火药、爆竹等暴力工具或圈套来应对杰瑞。但杰瑞十分聪明伶俐，一会儿使汤姆的诡计得不偿失，让汤姆自作自受。在这一个动画中，并没有动物世界中恃强凌弱的残忍，仅有两个邻居彼此之间的日常小事和矛盾。凭心而论，汤姆实际上是比杰瑞更有同情心的，那样的一只虽然拥有各式各样的“缺点”的好猫，一天到晚被1个不大的老鼠弄得灰头土脸，确实让人于心不忍。汤姆爱生气而敏感，杰瑞则独立且投机。在每集卡通片的末尾，通常是杰瑞以得意扬扬来表明自己的获胜，而TOM则是悲壮的输家。但是，也有也许出現下列结局：在极少的情况下，汤姆会取得胜利。
